Listlabs Pertussis Toxin  百日咳毒素

（Cat#179A Pertussis Toxin,PTX）

主要應(yīng)用：

PTX常與MOG（35-55），PLP（139-151），PLP（178-191）等免疫肽聯(lián)合注射動(dòng)物，從而建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型，即用來研究多發(fā)性硬化癥（Mutiple sclerosis，MS）的常用動(dòng)物模型。

基本介紹：

百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）是一種由6個(gè)非共價(jià)連接亞基組成的多元件蛋白，分子量范圍約為9-28kDa，這些亞基分別命名為S1，S2，S3，S4和S5，天然百日咳毒素中所占比為1:1:1:2:1，其中S4亞基以2倍形式存在。最大亞基為S1（也稱為A啟動(dòng)子），包含NAD+糖基水解酶和ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶活性。單獨(dú)的A啟動(dòng)子能夠?qū)AD+的ADP核糖轉(zhuǎn)移到Gαi，Gαo或Gαt家族G蛋白的α亞基。PTX的結(jié)晶結(jié)構(gòu)顯示其呈金字塔形狀，A啟動(dòng)子位于塔尖，中間是S5，最底端是二個(gè)二聚體，分別是S2-S4,和S3-S4。這5個(gè)亞基統(tǒng)稱為B寡聚體亞基（S2，S3，S4，S4和S5），允許PTX進(jìn)入大部分細(xì)胞，使其粘附在包括TLR4和糖蛋白Ib在內(nèi)受體蛋白的多糖殘基上。通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞后，PTX通過胞內(nèi)體途徑和高爾基體復(fù)合物逆向轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。A啟動(dòng)子從PTX上釋放出來，穿透內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并導(dǎo)致目標(biāo)膜偶聯(lián)的G蛋白失活。

生理功能：

百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）由Bordetella pertussis代謝純化所得，一種多亞基毒素，與大多數(shù)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞結(jié)合并特定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信號通路中的生理功能。PTX的生理效應(yīng)因G蛋白功能不同而變化。正是依賴Gi家族的蛋白偶聯(lián)受體來抑制信號通路的能力，PTX是細(xì)胞生物學(xué)研究中的一種重要工具。PTX通過抑制和調(diào)節(jié)各種宿主對Bordetella pertussis的免疫反應(yīng)在傳染方面發(fā)揮重要作用。鼠類動(dòng)物模型中PTX還能用來刺激建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫疾病，比如實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型。

產(chǎn)品信息

List labs提供三種配方形式的百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX），分別是甘油溶液（貨號：179），溶于緩沖液的凍干粉（貨號：180），以及溶于純水的凍干粉（貨號：181）。

組成：

每瓶含50ug的百日咳毒素，用：500ul水重懸后為：含50ug百日咳毒素的0.01mol/L的磷酸鈉，0.05mol/L氯化鈉，pH7.0的緩沖液。使用前請輕輕混勻，保證溶解為均質(zhì)狀態(tài)。請不要無菌過濾，這樣會(huì)導(dǎo)致原料損失。溫和操作，不要渦旋混勻。

產(chǎn)品濃度：

用牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品，Bradford 方法測定蛋白濃度。

純度：

16% SDS-PAGE電泳，有5條單獨(dú)條帶，與Tamura 等報(bào)道的一致，純度＞95%。

產(chǎn)品經(jīng)內(nèi)毒素檢測，在可接受范圍。

實(shí)驗(yàn)：

CHO細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：參照Hewlett等報(bào)道的方法，能夠引起陽性反應(yīng)的毒素濃度為：0.1ng/m（以具體批次為準(zhǔn)）l。注意：毒性可能因批次不同而不同。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化最佳的使用劑量。

腺苷酸環(huán)化酶測定實(shí)驗(yàn)：參照Wolff 報(bào)道的方法，Adenylate Cyclase 活性（以具體批次為準(zhǔn)）,出現(xiàn)1umol的鈣調(diào)蛋白，是1.6pmol CAMP/min/ug 毒素。

保存：

凍干粉形式和重懸后均2-8℃保存，不要凍。

活化：

本產(chǎn)品非活化形式，如果需要活化形式，請參照文獻(xiàn)（Kaslow et al）實(shí)驗(yàn)條件。

防護(hù)：

操作時(shí)，請穿上實(shí)驗(yàn)服，帶上手套和防護(hù)眼鏡。此產(chǎn)品僅供科研應(yīng)用，不可用于診斷試劑。對因不當(dāng)操作引起的傷害，公司不負(fù)責(zé)。