技術(shù)文章
Technical articles關(guān)節(jié)炎模型制備
背景簡介:
關(guān)節(jié)炎與人類風(fēng)濕病關(guān)節(jié)炎具有共同的免疫學(xué)和病理學(xué)特征,因此CIA模型被廣泛應(yīng)用于研究致病機(jī)理及治療方法的研究。膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CIA)應(yīng)用是用Ⅱ型膠原免疫Wistar(遠(yuǎn)親雜交)、Sprague-Dawley (遠(yuǎn)親雜交)和Wistar-Lewis (近交) 中誘導(dǎo)成功。由于此CIA模型具有與人風(fēng)濕病關(guān)節(jié)炎(RA)相同的免疫和病理特征,因此該模型先后擴(kuò)展到小鼠及非人靈長類動物,并已作為人類關(guān)節(jié)炎研究的廣泛應(yīng)用的模型。然而,對于CIA模型來說,不同種屬動物之間是有差異的。小鼠對CIA的敏感性與主要組織相容性復(fù)合體(MHC)相關(guān),在小鼠品系中只有DBA/1(H-2q)和B10.RⅢ(H-2r)兩個品系對CIA敏感。大鼠對CIA的敏感性也與MHC相關(guān),并與小鼠相比具有較寬的品系范圍。因此,不同MHC型的不同品系的大鼠,盡管關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率、嚴(yán)重程度及抗體和T-cell 的特異性在不同品系間不同,但都能夠誘發(fā)關(guān)節(jié)炎。
操作流程:
1) 小鼠CIA模型(膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎)
初次免疫:II型膠原&佐劑CFA(佐劑濃度依小鼠品系而定)配成的乳劑尾根部皮下100ul。
加強(qiáng)免疫:7天或21天后,II型膠原&佐劑IFA配成的乳劑尾根部皮下100ul。
4周左右發(fā)病,6-8周發(fā)病率達(dá)到高峰
2)大鼠CIA模型(膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎)
初次免疫:II型膠原&佐劑IFA配成的乳劑配成的乳劑尾根部皮下200ul。
加強(qiáng)免疫:7天或21天后,II型膠原&佐劑IFA配成的乳劑尾根部皮下100ul。
2-3周左右發(fā)病,3周后發(fā)病率達(dá)到高峰。
2) 小鼠CAIA模型(膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎)
方案A: 易感品系:DBA/1, Balb/c
0天:小鼠尾靜脈或腹腔注射1.5mg 5克隆合劑。
3天:小鼠腹腔注射25-50ug LPS
方案B: 鈍感品系:C57BL/6 or C57BL/6
0天:小鼠尾靜脈或腹腔注射5mg 克隆合劑。
3天:小鼠腹腔注射25-50ug LPS
注意:3-4天可誘發(fā)關(guān)節(jié)炎,7-10天達(dá)高峰期。10-14天可免疫LPS 加重炎癥反應(yīng)程度。
方案C: DBA/1 and Balb/c mice(不加LPS)
0天:小鼠尾靜脈或腹腔注射6-10mg
注意:2-3天可誘發(fā)關(guān)節(jié)炎
3) 大鼠AIA 模型(佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎)
尾根部皮下免疫0.05ml 佐劑(cat#7027 10 mg/ml)。這種方法的優(yōu)點是能夠使4只爪子都發(fā)生腫脹。
免疫后12-14天在爪子發(fā)生腫脹,關(guān)節(jié)炎會持續(xù)20-25天。
注:如果用(cat#7024 20 mg/ml)佐劑免疫,注射體積應(yīng)降低一半。
相關(guān)產(chǎn)品:
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
Chondrex | 20021 | Bovine Type II Collagen | 10 mg |
Chondrex | 20022 | Bovine Type II Collagen | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 20012 | Chick Type II Collagen | 10 mg |
Chondrex | 20011 | Chick Type II Collagen | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7001 | Complete Freund's Adjuvant | 4 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7002 | Incomplete Freund's Adjuvant | 5 ml |
Chondrex | 7008 | Complete Freund's Adjuvant | 1 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7009 | Complete Freund's Adjuvant | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7015 | Complete Freund's Adjuvant | 3 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7023 | Complete Freund's Adjuvant | 5 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7024 | Complete Freund's Adjuvant | 20 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 7027 | Complete Freund's Adjuvant | 10 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | 50010 | 五克隆抗體合劑 | 10mg |
Chondrex | 50040 | 五克隆抗體合劑 | 40mg |
Chondrex | 50100 | 五克隆抗體合劑 | 100mg |
國產(chǎn) | -- | 足趾容積測量儀 | |
國產(chǎn) | 手持式電動勻漿機(jī) |