技術(shù)文章
Technical articles一、原理（一）什么是熒光，簡單地講，當(dāng)用一定波長的光（如紫外光）照射某種物質(zhì)時，經(jīng)過照射的物質(zhì)在極短時間內(nèi)即可發(fā)射出一種可見的光，這種光即為熒光。在生物中，由于產(chǎn)生熒光的方式不同，可以概括地歸納為以下幾種：1．自發(fā)熒光：在生物的某些組織中，經(jīng)紫外線照射后能直接發(fā)射出熒光的稱為自發(fā)熒光（或直接熒光）。如植物組織中的葉綠素，經(jīng)紫外線照射后，即可發(fā)出紅色熒光。2．次生熒光：有些生物組織經(jīng)紫外線照射后，并不能發(fā)出熒光，但是當(dāng)它吸收熒光染料后也可以產(chǎn)生熒光，這種稱為次生熒光（或間接熒光...
1．固定：用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片，甲醛固定有時比冰凍丙酮好；但對于不同的組織和抗原，可選用不同的固定液。有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液，請于購置前注意說明書。BouinS固定液：飽和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其對組織的穿透力較強，固定較好，結(jié)構(gòu)完整，但因偏酸，對抗原有一定損害，且組織收縮明顯，不適于組織標本的長期保存。PLP液：即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛，適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織，對超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存...
臨床檢驗常見的標本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。（一）臨床標本的收集A、血液標本有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾，以條件一致為宜，如無法避免，應(yīng)在標本上注明該因素。1．外周血一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應(yīng)無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他...
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。（一）原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除...
動物樣品的采集及處理方法遺傳學(xué)數(shù)據(jù)在野生動物和圈養(yǎng)動物的保護和管理中變得日益重要。在本文中，我們總結(jié)了一些能簡便而有效地獲得樣品及數(shù)據(jù)的方法。我們在采集樣品之前，對將要進行的遺傳學(xué)分析有所了解。然而，采集者并非都是研究者，當(dāng)采集地與實驗室有相當(dāng)距離時，采集者常常要保存好樣品直到有合適的接受者或存放地，這就要求采集者應(yīng)具備一定的經(jīng)驗。首先，所有樣品均應(yīng)以個體序號進行標注，并且應(yīng)寫上種名、性別、采樣者姓名以及采集日期，越詳盡越好，以便同一個體的不同類數(shù)據(jù)可以相互引用，另外，地理來...
3T3swissSwiss小鼠胚胎成纖維細胞A549人肺癌細胞（能產(chǎn)生Keratin）CHOdhfr二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細胞CHO-K1中國倉鼠卵巢細胞Cyc-tAg小鼠T淋巴細胞瘤（SV40T抗原轉(zhuǎn)染）DU145人前列腺癌細胞FDC-P1小鼠正常骨髓細胞GH3大鼠垂體瘤細胞GT1.1人垂體瘤細胞（分泌促生長激素分泌激素）HEK-293人胚腎細胞Hela人宮頸癌細胞MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細胞MCF7人乳腺癌細胞MDA-MB-231人乳腺癌細胞MDA-MB-435s...
一、導(dǎo)論質(zhì)粒提取的原理:轉(zhuǎn)自復(fù)旦大學(xué)一位老師的帖子，后面是方法介紹堿裂解法從大腸桿菌制備質(zhì)粒，是從事分子生物學(xué)研究的實驗室每天都要用的常規(guī)技術(shù)?？墒俏沂昭芯可畮啄炅?，幾乎毫無例外的是我那些給人感覺什么都知道的學(xué)生卻對堿法質(zhì)粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因為《分子克隆》里面只講實驗操作步驟，而沒有對原理進行詳細的論述。這是導(dǎo)致我的學(xué)生誤入歧途的主要原因。后來我發(fā)現(xiàn)其實是整個中國的相關(guān)領(lǐng)域的研究生水平都差不多，甚至有很多“老師”也是這個狀態(tài)。這就不得不讓人感到悲哀了...
FluorescentDye（熒光染料）Excitation（激發(fā)波長，nm）Emission（發(fā)射波長，nm）Cy2489506GFP（RedShifted）488507YO-PRO-1491509YOYO-1491509Calcein494517FITC494518FluorX494519Alexa488490520Rhodamine110496520ABI,5-FAM494522OregonGreen?500503522OregonGreen?488496524Rlbo...
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