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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 20136-17
    標(biāo)本的收集與保存注意事項(xiàng)

    臨床檢驗(yàn)常見的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。一、血液標(biāo)本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對(duì)燒傷...

  • 20136-13
    Western Blot 原理和操作方法

    WesternBlot工作原理蛋白質(zhì)的電泳分離是重要的生物化學(xué)分離純化技術(shù)之一,電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)作用下,向著與其電荷相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象.根據(jù)所采用的支持物不同,有瓊脂糖凝膠電泳,淀粉凝膠電泳,聚丙烯酰胺凝膠電泳等.其中,聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)由于無電滲作用,樣品用量少(1-100μg),分辨率高,可檢出10-9-10-12mol的樣品,凝膠機(jī)械強(qiáng)度大,重復(fù)性好以及可以通過調(diào)節(jié)單體濃度或單體與交聯(lián)劑的比例而得到孔徑不同的凝膠等優(yōu)點(diǎn)而受到廣泛的應(yīng)用.SDS-PAG...

  • 20136-13
    熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測(cè)量單細(xì)胞中比率鈣

    熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測(cè)量單細(xì)胞中比率鈣中國(guó)醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志1999年第3期第16卷實(shí)驗(yàn)研究作者:馬曉冬朱曉亮趙清張瑾張颯雷國(guó)華黃行許鮑永耀單位:馬曉冬趙清張瑾張颯雷國(guó)華黃行許鮑永耀(*軍醫(yī)大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室);朱曉亮(南方醫(yī)院皮膚科,廣東廣州510515)關(guān)鍵詞:激光掃描共聚焦顯微鏡;Fluo-3/AM;FuraRed;比率鈣...摘要:應(yīng)用ACAS570激光掃描共聚焦顯微鏡(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM簡(jiǎn)稱共焦顯微...

  • 20136-13
    激光掃描共焦顯微鏡原理及其應(yīng),細(xì)胞上的定位很漂亮

    激光掃描共焦顯微鏡(LSCM)是八十年代問世的一種新型分析儀器,由于其高分辨率,高靈敏度,高放大率等特點(diǎn),在細(xì)胞水平上能作多種功能測(cè)量和分析,成為分析細(xì)胞學(xué)的重要研究工具,激光掃描共焦顯微鏡是在顯微鏡基礎(chǔ)上配置激光光源,掃描裝置,共軛聚焦裝置和檢測(cè)系統(tǒng)而形成的新型顯微鏡。它對(duì)活細(xì)胞分層掃描后得到光學(xué)切片,可進(jìn)行細(xì)胞三維重建。測(cè)量分析細(xì)胞形態(tài)學(xué)參數(shù)和熒光強(qiáng)度。利用熒光探針標(biāo)記LSCM可以對(duì)細(xì)胞內(nèi)微細(xì)結(jié)構(gòu)和離子的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行定性、定量、定時(shí)和定位分析。LSCM可以進(jìn)行顯微手術(shù),細(xì)...

  • 20136-13
    流式細(xì)胞儀測(cè)定血小板胞漿游離鈣濃度

    流式細(xì)胞儀測(cè)定血小板胞漿游離鈣濃度莊明明,溫奕欣,劉少列,洪曉鵬西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)2005年10月第26卷第5期摘要:目的建立流式細(xì)胞儀測(cè)定血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的方法。方法用Fluo3AM作為鈣指示劑,在有或無細(xì)胞外鈣\[Ca2+\]o存在的條件下,測(cè)定靜息和凝血酶激活狀態(tài)下人血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的變化。結(jié)果Fluo3AM標(biāo)記的血小板的平均熒光強(qiáng)度明顯增加。凝血酶使負(fù)載Fluo3AM標(biāo)記的血小板胞漿\[Ca2+\]i明顯增加,且...

  • 20136-13
    如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?

    培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊琈EM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)"細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)"細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)AIMV(12005)培養(yǎng)基(SFM)。L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會(huì)降解,但是確切的降解率一...

  • 20136-13
    影響ELISA試驗(yàn)效果常見分析,和解決思路

    ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是...

  • 20136-13
    ELISA的精點(diǎn)摘要,不要錯(cuò)過奧

    的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。4.1標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)...

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